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利用微生物評價供試品祛痘功效

痤瘡丙酸桿菌抑菌實驗方案

【評價原理】

痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes),也稱痤瘡桿菌、瘡皰丙酸桿菌,是造成青春痘的主要細菌?;蚪M研究顯示該細菌的幾個基因能夠制造一些分解皮膚組織的酶和免疫原性的蛋白質(zhì)。痤瘡丙酸桿菌是皮膚上的優(yōu)勢菌群,棲居于毛囊、皮脂腺內(nèi),可從人的鼻咽、口腔、腸道和泌尿道中分離。而痤瘡丙酸桿菌的大量增殖是引起痘痘形成和加重的重要因素之一。

利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴散形成不同濃度梯度,以顯示其抑菌作用。通過抑菌環(huán)大小以判斷供試品是否具有抑菌能力。

【實驗方法】

取空白無菌藥敏紙片(或牛津杯),用無菌鑷子蘸取待檢少許樣品于紙片上,涂抹均勻。取痤瘡丙酸桿菌菌懸液100 uL(5×10^5 ~ 5×10^6 CFU/mL)在BHI平板培養(yǎng)基上用L型涂布棒均勻涂布(以平板無可見水滴為準(zhǔn))。隨后進行抑菌試驗樣片貼放:每次試驗貼放1個染菌平板,每個平板貼放4片試驗樣片,1片對照樣片,共5片。貼放完畢后用無菌鑷子輕壓樣片,使其緊貼于平板表面。蓋好平皿,置 36 ℃溫箱,厭氧培養(yǎng)3-5 d后觀察結(jié)果。該試驗重復(fù)3次。

【評價指標(biāo)】抑菌環(huán)的大小

【結(jié)果展示】(展示圖片僅供參考,實際實驗組別依據(jù)合同而定)

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圖1 抑菌環(huán)大小表型圖

【評價結(jié)論】

1、抑菌環(huán)直徑大于7 mm,判為有抑菌作用;3次重復(fù)試驗(共12個樣片)均有抑菌作用,判為合格。

2、本實驗初步證實了該供試品具有痤瘡丙酸桿菌抑制作用。

【參考文獻】

[1]衛(wèi)生部2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》-2.1.8.2抑菌環(huán)試驗

[2]WS/T650-2019 抗菌和抑菌效果評價方法-5.1.4抑菌環(huán)試驗

[3] 王慶芬;楊育儒;沈秋蓮;張榮.枇芩顆粒劑體外抑制金黃色葡萄球菌和痤瘡丙酸桿菌的作用.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2015(12)

[4]QB/T 2738-2012 日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評價方法

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